quelq est le principe de la méthode elisa sandwich? – What is the principle of the ELISA sandwich method?

BNO TeamApril 22, 2025

Answered

• La méthode ELISA sandwich est une technique immunologique utilisée pour détecter et quantifier des antigènes spécifiques dans un échantillon biologique.

• Le principe repose sur l’utilisation de deux anticorps spécifiques dirigés contre deux épitopes différents du même antigène. L’antigène est ainsi “sandwiché” entre ces deux anticorps, ce qui permet une détection spécifique et sensible.

• La première étape consiste à fixer un anticorps de capture sur la surface d’une plaque de microtitrage. Cet anticorps est spécifique de l’antigène cible et permet de l’immobiliser dans le puits de la plaque.

• Après une incubation et un lavage pour éliminer les anticorps non fixés, l’échantillon contenant l’antigène est ajouté. Si l’antigène est présent, il se lie à l’anticorps de capture.

• Un deuxième anticorps, appelé anticorps de détection, est ensuite ajouté. Cet anticorps est également spécifique de l’antigène, mais se lie à un épitope différent de celui reconnu par l’anticorps de capture.

• L’anticorps de détection est souvent conjugué à une enzyme, comme la peroxydase de raifort (HRP), qui catalyse une réaction produisant un signal mesurable, généralement une couleur ou une fluorescence.

• Après une incubation et un lavage pour éliminer les anticorps non liés, un substrat de l’enzyme est ajouté. La réaction enzymatique produit un signal proportionnel à la quantité d’antigène présente dans l’échantillon.

• La méthode ELISA sandwich est particulièrement adaptée à la détection d’antigènes présents à des concentrations faibles ou dans des matrices complexes, car elle offre une grande spécificité et sensibilité.

• Elle est largement utilisée dans les domaines de la recherche biomédicale, du diagnostic clinique et de la surveillance des maladies infectieuses.